Le chyme acide au contact du duodénum provoque la sécrétion bilio-pancréatique : sels biliaires, lipases et colipase. Stabilité thermique de la matière grasse.

L'exemple le plus illustratif est la puissance de sonication du milieu, qui doit être optimale. On laisse alors le milieu évoluer sous agitation magnétique (250 rpm) pendant 120 minutes. Malgré la linéarité de la vitesse initiale de réaction en fonction de la quantité de lipase ajoutée, une inhibition compétitive à l'interface des lipides en émulsion reste présente.Conformément à ce qui a déjà été évoqué dans la littérature ou dans les précédents rapports d'avancement, la quantité de lipase introduite a un effet positif sur la cinétique d'hydrolyse des lipides de la graine. Ainsi, l'apport de composés potentiellement inhibiteurs est contrebalancé par l'ajout en parallèle d'une proportion identique de lipase. Toutefois, un degré d'hydrolyse d'environ 95% est déjà obtenu après 120 minutes de réaction à la température de 27°C. Un ajustement linéaire a été réalisé pour confirmer cette tendance.

En particulier, le demandeur s'est attaché à mettre au point un procédé amélioré ne nécessitant pas une étape d'extraction de l'huile préalable à la mise en contact de la lipase avec les lipides dont l'hydrolyse, respectivement en acides gras et alcools, est recherchée.De manière surprenante, on a montré selon l'invention qu'une hydrolyse quasi-complète des lipides contenus dans des graines de plantes pouvait être obtenue en faisant agir une lipase exogène dans un milieu réactionnel hétérogène solide/liquide dans lequel le substrat lipidique est présent.Plus précisément, on a montré selon l'invention, qu'une lipase exogène placée dans un milieu réactionnel substrat hétérogène solide/liquide, lequel milieu réactionnel est soumis à un traitement d'homogénéisation drastique à haute pression ou par ultrasons, conserve son activité catalytique d'hydrolyse des lipides contenus dans la solution substrat ainsi traitée.On a également montré selon l'invention qu'une lipase exogène était capable d'effectuer une hydrolyse complète ou quasi-complète des lipides présents, dans ce milieu réactionnel hétérogène solide/liquide, sous la forme d'une émulsion constituée de gouttelettes d'huile dispersées dans un milieu aqueux, et que les acides gras résultant de l'hydrolyse des lipides contenus dans ladite émulsion pouvaient être facilement récupérés, par exemple par simple extraction.Il a enfin été montré selon l'invention qu'un traitement de graines de plantes par broyage et homogénéisation permettait de rendre accessible la plus grande partie des lipides initialement contenus dans les graines à l'action d'une lipase exogène.La présente invention a pour objet un procédé de préparation d'acides gras par hydrolyse Selon le procédé ci-dessus, l'étape a) de broyage est réalisée à l'aide d'un broyeur à couteauxde type « Waring Blendor » dans un milieu aqueux. L'étape de sonication est quant à elle remplacée par deux cycles d'homogénéisation par un homogénéisateur Lab 1000 (APV, Evreux, France) muni de deux étages d'homogénéisation.

Une vue d'ensemble a tout d'abord été prise. 61:1067-1071PARK Y K et al. Le seul paramètre qui aurait pu être limitant est la quantité d'eau disponible pour que la réaction ait lieu. Quatre-vingt-dix grammes du broyat de graine précédemment obtenu sont additionnées de 10 grammes de solution enzymatique dans un bécher à double enveloppe de 150 ml. Parallèlement, la lipase issue de L'effet de la puissance ultrasonore dissipée dans le milieu réactionnel est présenté sur la Cette observation vérifie l'importance du rôle de l'étape de sonication du milieu. Aucun essai d'extraction des acides gras et des alcools n'est donc décrit.Le demandeur s'est attaché à mettre au point un procédé amélioré de préparation d'acides gras, par hydrolyse des lipides contenus dans les graines d'une plante, qui soit simple, rapide, et qui permette l'obtention d'un haut rendement d'hydrolyse. On ne trouve donc pas d'inhibition pour les faibles quantités de lipase.Cette observation est par ailleurs confortée par les calculs d'activité spécifique qui indiquent que l'enzyme conserve, aux erreurs expérimentales près, une efficacité relativement constante quelle qu'en soit la concentration.Cependant, ces données n'indiquent pas pour autant que l'efficacité de la lipase à l'interface est optimale. La différence de poids nous renseigne sur la quantité d'eau contenue dans l'émulsion.Ce test à été effectué sur trois émulsions indépendantes.On attend par l'huile la quantité d'acides gras issus de l'hydrolyse des triglycérides des lipides des graines broyées.La teneur en huile de notre émulsion est déterminée selon une "méthode simplifiée par extraction à l'hexane" (Norme V 03-908). (c.f.) LANOLIN), FATTY OILS AND WAXES, INCLUDING EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS; ESSENTIAL OILS; PERFUMESProduction of fats or fatty oils from raw materialsLINFIELD W M et al., 1984, J. En général, l'obtention de particules solides d'un diamètre moyen inférieur à 500 µm peut être obtenu par une durée de broyage des graines dans le milieu aqueux de quelques minutes, de préférence entre 1 et 10 minutes et de manière tout à fait préférée entre 2 et 7 minutes, par exemple pendant une durée de 5 minutes.Le milieu aqueux de broyage est préférentiellement de l'eau mais peut être également toute solution tampon, telle que par exemple les deux solutions tampons ci-dessous :

La différence de DH entre 0 et 15 minutes est donc égale à la quantité d'acides gras produits durant cette période, normalisée par la quantité de radicaux acide gras totaux.Par ailleurs, on a également rapporté la vitesse initiale moyenne d'hydrolyse à la masse de poudre enzymatique introduite dans le milieu. 61:1067-1071PARK Y K et al.

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